NMT测试液标准

各指标测试液总要求

检测指标 测试液要求
Cl-  不能添加NO3-
 Na+  添加K+浓度时需低于Na+浓度10倍
 Cu2+  不能添加Cl-
 Pb2+  不能添加Cl-
 NH4+  不能添加K+
 Mg2+  建议不添加Cd2+和Ca2+,如需添加则需要低于Mg2+浓度10
 Cd2+  添加Ca2+浓度不能高于Cd2+

植物根系

适用于植物根系等直接接触培养环境的组织

检测指标 测试液成分
H+  xx mM CaCl2,0.3mM MES ,pH6.0
 K+ xx mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Na+  xx mM NaCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Ca2+  xx mM CaCl2,pH6.0
 Cl- xx mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 NH4+  xx mM NH4Cl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 NO3-  0.1mM CaCl2,xx mM NaNO3,pH6.0
  Cd2+  xx mM CdCl2,xxmM CaCl2,pH6.0
 Pb2+  xx mM Pb(NO3)2,pH6.0
 Cu2+  xx mM Cu(NO3)2(也可使用CuSO4),pH6.0
  Mg2+  xx mM MgCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0
 O2  0.1mM CaCl2,pH6.0
 H2O2  0.1mM CaCl2,pH6.0
IAA  0.1mM CaCl2,pH6.0
校正液及备注
(1)pH:植物组织测试液pH为6.0,特殊样品以培养环境的pH为准。(如在pH7环境下培养/处理的样品,可将pH设置为7)
(2)待测离子浓度与培养/处理环境中该离子浓度一致(如检测Cd2+,培养环境为0.5 mM CdCl2,测试液可用0.5 mM CdCl2,pH6.0)检测指标为分子时直接使用左侧列表中对应的溶液。
(3)校正液:根据测试液中待测指标浓度,设置高于和低于测试液浓度的校正液,且高低校正液浓度一般相差10倍。(如K+测试液为0.5 mM KCl,pH6.0,校正液为1mM KCl,pH6.0/0.1mM KCl,pH6.0)

叶肉细胞,保卫细胞,茎等

不直接接触培养环境的样品(如叶肉细胞,保卫细胞,茎等)

检测指标 测试液成分
H+ 0.1mM CaCl2,0.3mM MES ,pH6.0
 K+ 0.1mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Na+ 0.5mM NaCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Ca2+ 0.1mM CaCl2,pH6.0
 Cl- 0.1mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 NH4+ 0.1mM NH4Cl,0.1mM CaCl2,pH6.0
 NO3- 0.1mM CaCl2,0.1mM NaNO3,pH6.0
  Cd2+ 0.1mM CdCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0
 Pb2+ 0.1mM Pb(NO3)2,pH6.0
 Cu2+ 0.1mM Cu(NO3)2,pH6.0
  Mg2+ 0.1mM MgCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0
 O2 0.1mM CaCl2,pH6.0
 H2O2 0.1mM CaCl2,pH6.0
IAA 0.1mM CaCl2,pH6.0
校正液及备注

校正液:根据测试液中待测指标浓度,设置高于和低于测试液浓度的校正液,且高低校正液浓度一般相差10倍。(如K+测试液为0.1 mM KCl,pH6.0,校正液为0.5mM KCl,pH6.0/0.05mM KCl,pH6.0)

动物细胞

检测指标:H+、K+、Na+、Ca2+、Cl-、NH4+、NO3-、Cd2+、 Pb2+、 Cu2+、 Mg2+、O2、H2O2

测试液成分:

测试液1:1.8 mM CaCl2,5.0 mM KCl,25 mM NaHCO3,100 mM NaCl,0.8 mM MgSO4,pH 6.8

测试液2:0.4 mM Ca(NO3)2,0.5 mM MgSO4,5.0 mM KCl,20 mM NaHCO3,100 mM NaCl,pH 6.8

测试液3:1.0 mM CaCl2,2.0 mM MgCl2,3.0 mM KCl,25 mM NaHCO3,100 mM NaCl,pH 6.8

 

校正液及备注:

(1)MEM、DMEM、IMDM、GMEM等相似培养基培养的细胞使用测试液1。

(2)RPMI-1640等相似培养基培养的细胞使用测试液2。

(3)Ham's F12等相似培养基培养的细胞使用测试液3。

(4)检测NH4+、Cd2+、Pb2+、Cu2+时,在对应测试液1,测试液2,测试液3成份基础上,加上待测离子成份即可。

(5)检测Pb2+、Cu2+时,需要将Cl-更换为NO3-或者SO42-

(6)校正液:根据测试液中待测指标浓度,设置高于和低于测试液浓度的校正液,且高低校正液浓度一般相差10倍。

花粉管

检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA

测试液成分:0.1 mM CaCl2, 0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 1.6 mM H3BO3, 0.3 mM MES, 5% sucrose, pH 5.8

注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-

种子

检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA

测试也成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.2 mM Na2SO4, 0.3 mM MES, pH 6.0

注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-

液泡、原生质体

检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA

测试液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 1.0 mM NaCl, 600 mM mannitol, 0.05mM MES, pH 6.0

注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-

 

检测指标:Cd2+

 

测试液成分 ** mM Cd2+(根据实验Cd2+处理浓度定), 0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.5 mM NaCl,600 mM mannitol, 0.05mM MES, pH 6.0

酵母细胞

检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-

测试液成分:0.1 mM CaCl2, 0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 0.3 mM MES, 10 mM glucose, pH 6.0

注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-

 

检测指标:IAA、O2、H2O2

 

测试液成分: 酵母培养基稀释100倍

硅藻(淡水)

检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、H2O2、IAA

测试液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, 0.1% sucrose, pH 7.8

注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-

硅藻(淡水,BG11培养基)

检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、H2O2、IAA

测试液成分:0.1 mM KCl, 0.2 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 15 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, 0.1% sucrose, pH 7.8

注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-

绿藻(淡水)

检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、IAA

测试液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 7.1

注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-

绿藻(海水)

检测指标:H2O2、Ca2+、IAA

测试液成分:360mM NaCl, 2.0mM NaHCO3, 8.0mM KCl, 0.1mM Na2SO4, 0.1mM CaCl2, pH8.1

大肠杆菌

检测指标:H+、K+、Na+

测试液成分:0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 0.1 mM HEPES, 1.0 mM glucose, pH 7.0

愈伤组织

检测指标:H+、K+、Na+

测试液成分:1.0 mM NaCl, 0.1 mM KCl, 0.2 mM CaCl2, pH 6.0

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